IX Международная студенческая научная конференция Студенческий научный форум - 2017

Спаржа бурятская (asparagus burjaticus) является забайкальско-хангайским эндемиком.

Ареал спаржи бурятской охватывает правобережье и левый берег реки Селенги, где растение произрастает на песчаных склонах и в каменистых степях в зарослях ильма [1].

Asparagus burjaticus - весьма перспективное сырье как в области пищевой промышленности [2], так и в качестве лекарственного средства. Рассматриваемый растительный материал представляет собой богатый источник для получения различных групп биологически-активных соединений: аспарагина, минералов, сапонинов, кумаринов, витамина С, витаминов группы В, в том числе - флавоноидов [3]. В последние годы флавоноидные соединения представляют собой научный интерес ввиду выраженного диуретического, противовоспалительного, антиоксидантного, кардиотропного, гепатопротекторного действия [4].

В настоящее время не существует фармакопейной статьи для стандартизации рассматриваемого растительного сырья. Также следует отметить тот факт, что спаржа бурятская является недостаточно изученным растением с точки зрения химии и технологии фитопрепаратов, что обусловливает актуальность и научную новизну данной работы.

Для качественного обнаружения флавоноидов широко используется тонкослойная хроматография (ТСХ). Ради практической реализации метода необходимо грамотно проанализировать информацию о рекомендуемых сорбентах и системах растворителей.

Экспериментальная часть

Объектом исследования служит водно-спиртовое извлечение, полученное методом ультразвуковой экстракции из корней спаржи бурятской, собранных в 2015 году.

В ходе анализа научной литературы выбраны системы растворителей с оптимальными показателями выявления флавоноидов в извлечениях из растительного сырья [5]. Хроматографирование осуществляют на пластинах Silufol UV - 254 с алюминиевой подложкой, объем пробы – 3 мкл. С целью лучшего обнаружения флавоноидных соединений изучены следующие системы растворителей: н-бутанол-ледяная уксусная кислота-вода (4:1:5) (БУВ), бензол-этанол-ледяная уксусная кислота (45:8:3), этилацетат-ледяная уксусная кислота-вода (75:15:15). Для проявления флавоноидов на хроматослайдах рассмотрены следующие детектирующие агенты: 5 % спиртовый раствор AlCl₃, 2% водный раствор H₂SO_4, пары аммиака и проявление в УФ-свете [5]. Результаты экспериментов представлены в таблице 1.

Таблица 1 – Данные качественного обнаружения флавоноидов методом ТСХ в извлечении из спаржи бурятской

№ п/п	Rf ±0,01	Окраска пятна после проявления в видимом свете	Окраска пятна после проявления в УФ-свете
1	2	3	4
Система растворителей н-бутанол-ледяная уксусная кислота-вода (4:1:5)
1	0,20	светло-коричневая	-
2	0,30	светло-коричневая	-
3	0,36	светло-коричневая	-
4	0,45	светло-коричневая	светло-желтая флуоресценция
5	0,54	светло-коричневая	-
6	0,74	коричневато-бурая	светло-желтая
Система растворителей бензол-этанол-ледяная уксусная кислота (45:8:3)
1	0,46	светло-желтая	-
2	0,49	светло-желтая	-
3	0,66	светло-желтая	желто-зеленая флуоресценция
4	0,06	светло-желтая	желто-зеленая флуоресценция
Система растворителей этилацетат-ледяная уксусная кислота-вода (75:15:15)
1	0,34	оранжево-коричневая	желтая
2	0,33	оранжево-коричневая	желтая
3	0,29	желтая	желто-зеленая флуоресценция
4	0,18	оранжево-коричневая	желтая

Наилучшее детектирование флавоноидов наблюдается при использовании паров аммиака. Из экспериментальных данных (табл. 1) видно, что в системе БУВ обнаружено не менее 6 флавоноидов. Поскольку рутин – один из наиболее распространенных флавоноидов в растительном сырье, то в качестве стандартного образца выбран раствор рутина с концентрацией 0,6 мг/мл. Значения фактора удерживания (R_f) для раствора стандартного образца (РСО) рутина, полученные опытным путем, представлены в таблице 2.

Таблица 2 – Результаты обнаружения рутина в различных системах растворителей

№ п/п	Система растворителей	Rf±0,01
		Водно-спиртовое извлечение	РСО рутина
1	Н-бутанол-ледяная уксусная кислота-вода (4:1:5)	0,45	0,44
2	Бензол-этанол-ледяная уксусная кислота (45:8:3)	0,06	0,06
3	Этилацетат-ледяная уксусная кислота-вода (75:15:15)	0,34	0,35

Во всех изученных системах растворителей идентифицирован рутин по величине R_fи характеру окраски и флуоресценции. Согласно данным литературного источника [3] пятно №3, идентифицированное в системе бензол-этанол-ледяная уксусная кислота, характерно для флавонол-3-гликозидов, флавонов или их гликозидов. В настоящий момент времени ведутся работы по подбору оптимальных параметров проведения спектрофотометрического анализа вытяжки из спаржи бурятской.

Выводы

В ходе проведенного исследования водно-спиртовых извлечений спаржи бурятской установлено, что наилучшие результаты по обнаружению флавоноидов наблюдаются в системе БУВ с применением в качестве детектирующего агента паров аммиака. Вместе с тем выявлено присутствие не менее 6 флавоноидов, среди которых идентифицирован рутин.

ЛИТЕРАТУРА

1. Черепнина, Л. М. Флора и растительность Сибири и Дальнего Востока. Чтения памяти: материалы Пятой Всероссийской конференции с международным участием: в 2 т. / Е. М. Антипова (отв. ред.); ред. кол.; Краснояр. гос. пед. ун-т им. В.П. Астафьева. – Красноярск, 2011. – Т.2. – 420 с.

2. Мункуева, С. Д. Пути использования водно-спиртовых экстрактов пищевых растений Забайкалья / С. Д. Мункуева // Вестник Алтайского государственного аграрного университета. – 2013. - №6. – С.100 – 103.

3. Анцупова, Т. П. Проблемы изучения лекарственных растений Забайкалья / Т. П. Анцупова, Г. Б. Ендонова, Л. В. Мазур, Е. П. Павлова // Ученые записки ЗабГУ. – 2014. - №1. – С.6 – 12.

4. Ильина, Л. П. Сравнительное изучение химического состава лекарственных растений Западного Забайкалья / Л. П. Ильина, Г. Б. Ендонова, Т. П. Анцупова // Вестник Бурятской Государственной сельскохозяйственной академии им. В. Р. Филиппова. – 2011. – №3. – С. 75 – 80.

5. Чечета, О. В. Выбор оптимальных параметров хроматографического определения рутина методом ТСХ / О. В. Чечета, А. И. Сливкин, И. И. Сафонова // Пути и формы совершенствования фармацевтического образования. Поиск новых физиологически активных веществ: сб. статей. ч. 2. – Воронеж, 2010. – С.407 – 410.

Код для цитирования: Скопировать