IX Международная студенческая научная конференция Студенческий научный форум - 2017

Современная медицина требует применения высокоскоростных и производительных технологий, которые выдают большое количество анализов с минимальными трудозатратами в сжатые сроки. Мультиплексный анализ (англ. Multiplex assay) - тип медико-биологических аналитических методов, позволяющих одновременно измерять концентрацию множества аналитов в одном биологическом образце. Аналит – компонент, искомый или определяемый в пробе вещества или объекта аналитического контроля (ГОСТ Р 52361-2005). Основными аналитами в медицине являются гормоны, цитокины, хемокины и белковые молекулы, концентрацию которых необходимо знать для точной постановки диагноза в клинике.

Среди мультиплексных методик большее распространение получила суспензионная технология хМАР, основанная на использовании принципов проточной цитометрии [4, 5], с применением микросфер из полистирола, маркированных красными и инфракрасными флюрофорами. Благодаря данной методике удалось улучшить не только показатели уже существующих лабораторных тестов, но и решить ряд проблем касающихся времени проведения анализа, объёма образца, которые необходимы для исследования. Мультиплексная технология хМАР позволяет теоретически определить 100 различных белков или гормонов в 50 мкл образца [6]. Традиционные методы определения антител и других белковых молекул требуют отдельных наборов. При анализе можно взять только одну пробирку с исследуемой кровью, которой хватит для определения множества параметров, необходимых врачу для постановки диагноза и назначения лечения пациентам [3]. Также мультиплексный анализ успешно применяется для изучения роли провоспалительных цитокинов в патогенезе ревматоидного артрита [1]. Мультиплексного анализ применяется для анализа уровней биомаркеров неоангиогенеза и воспаления до и после трансплантации сердца [2].

На открытой платформе LUMINEX возможно комбинирование на основе микросфер с антителами, комплементарными к различным аналитам: цитокинам, факторам роста, хемокинам, матриксным металлопротеиназам, апо-белкам, факторам коагуляции, белкам сигнальной трансдукции, транскрипционным факторам, белкам системы комплемента, метаболических маркеров, маркеров сепсиса, факторов транскрипции, ядерных рецепторов. Микросферы с прикрепленными олигонуклеотидами позволяют определять экспрессию генов, количество РНК, количество копий ДНК.

Первоначально мультиплексный анализ был разработан для научных исследований, но со временем этот метод стал применяться в клинической диагностике. С помощью мультиплексного анализа в клинике диагностируют аллергические реакции, инфекционные и аутоиммунные заболевания. Исследуют вирусные респираторные заболевания. В онкологии можно диагностировать с помощью различных маркеров заболевания клеток толстой кишки, клеток печени, предстательной железы, яичников, легких. В кардиологической и эндокринологической практике возможна диагностика сердечно - сосудистых заболеваний, заболевания обмена веществ.

Таким образом, мультиплексный анализ позволяет получить «море» информации из капли крови [3]. В ходе проделанной мною работы, было изучено множество источников литературы. В дальнейшем планируется освоение прибора Luminex 100/200, а также разработка методических подходов для решения ряда научных проблем.

Список литературы

1. Новиков А.А., Александрова Е.Н., Попкова Т. В., Линева О.Г., Авдеева А.С., Новикова Д.С., Кузикянц Г.Х., Лукина Г.В., Сигидин Я.А., Караулов А.В., Быковская С.Н., Насонов Е.Л. Роль мультиплексного анализа цитокинов в оценке эффективности ритуксимаба при лечении ревматоидного артрита // Научно-практическая ревматология. – 2011. – №. 5. – С. 51-57.

2. Шевченко О. П., Стаханова Е. А., Гичкун О. Е., Курабекова Р. М., Муминов И. И., Шевченко А.О. Мультиплексный анализ биомаркеров неоангиогенеза и воспаления у реципиентов сердца //Вестник трансплантологии и искусственных органов. – 2015. – Т. 17. – №. 1-2015. – С.12-17.

3. Данилов А. Н. Технология xMAP в клинической лабораторной диагностике: возможности и перспективы // Лечебное дело. – 2011. – №. 4. – C. 91-95

4. Шилов С.Ю., Жукова А.Е., Петухова А.А., Барков С.Ю., Шилов Ю.И. Оценка фагоцитарной активности перитонеальных клеток и лейкоцитов крови крыс с использованием маркера ацидификации фагосом pHrodoTM // Российский иммунологический журнал. - 2015. - Том 9(18), № 2(1). - С. 352-354.

5. Шилов Ю.И., Шилов С.Ю., Жукова А.Е., Барков С.Ю., Петухова А.А. Изменение уровня ацидификации фагосом у крыс в зависимости от фазы эстрального цикла // Российский иммунологический журнал. - 2016. - Т. 10 (19), № 2 (1). - С. 183-184.

6. Kim J. S. (ed.). The microflow cytometer. – Pan Stanford Publishing, 2010. – 379 pp.

Код для цитирования: Скопировать