IX Международная студенческая научная конференция Студенческий научный форум - 2017

Носительство стафилококковой инфекции не является основанием для лечения. Если у совершенно здорового человека вдруг в посеве кала (грудного молока, мазка из носоглотки, зева, кожи и так далее) высевается золотистый стафилококк, лечить его имеет никакого смысла. Напомним, что Staphylococcus aureus — условно-патогенный микроорганизм, который может жить, сколько угодно на слизистых и не причинять никакого вреда. Однако, если болезнь принимает серьезный характер, необходимо применять антибиотики. [1-8]

Стафилококковые инфекции кожи — многочисленные фурункулезы, карбункулезы, фолликулиты и другие заболевания — могут причинять немало проблем. При генерализованном, обширном процессе без антибиотиков не обойтись. Однако гораздо чаще заболевание протекает локально, и высыпания в основном концентрируются на каком-то одном участке.

Стафилококки в основном устойчивы ко многим антибиотикам или быстро к ним адаптируются.

Чувствительность микроорганизмов к антибиотикам определяют методами:

1. серийных разведений в жидкой или на плотной питательной среде;

2. диффузии в агар с применением дисков, содержащих антибиотики.

Исследованию на чувствительность к антибиотикам подвергается не исследуемый клинический материал (гной, мокрота, моча и т.д.), а микроб-возбудитель, выделенный в чистой культуре из этого материала. Поэтому исследуемый материал должен быть взят до начала антимикробной терапии.

По степени чувствительности к антимикробным препаратам микроорганизмы принято разделять на три группы: чувствительные, промежуточные и устойчивые (резистентные). Существует два подхода к интерпретации этих понятий.

1. Клинический подход, основанный на оценке эффективности антибактериальной терапии.

2. Микробиологический подход основан на анализе концентраций антибиотика в питательной среде.

Методы, применяемые в бактериологической лаборатории для определения чувствительности (устойчивости) возбудителей к антимикробным препаратам, принято разделять на две группы:

1. Методы серийных разведений антибиотика в питательной среде:

• разведение химиопрепарата в жидкой питательной среде;

• разведение химиопрепарата в плотной питательной среде.

1. Диффузные методы:

• дискодиффузионный метод;

• Е-тест.

Наиболее прост и доступен метод определения чувствительности с помощью дисков, пропитанных антибиотиками (дискодиффузионный метод). В стерильные чашки Петри, расположенные на горизонтальной поверхности, разливают по 15-20 мл плотной питательной среды(чаще всего 2 % агар на переваре Хоттингера, содержащий 0,11 - 0,13 % аминного азота). На поверхность застывшего и слегка подсушенного агара наливают 1 мл суспензии суточной культуры микроба-возбудителя, эквивалентную стандарту мутности 0,5 по Мак-Фарланду. Бактериальную взвесь равномерно распределяют по поверхности агара, а ее избыток удаляют пастеровской пипеткой. На поверхности засеянного агара пинцетом раскладывают диски с антибиотиками – по 5 – 6 дисков на каждую чашку на расстоянии 25 мм от центра чашки. См. рис 1.[1-6]

Рис. 1 Диско-диффузионный метод

Коммерческие диски диаметром 6 мм изготавливают из специального картона, а концентрация антибиотика в диске соответствует рекомендациям ВОЗ (Всесоюзная организация здравоохранения). В настоящее время за рубежом производят диспенсеры, позволяющие одновременно размещать на чашке с плотной питательной средой 6,8 12 дисков с антимикробными препаратами. Для размещения 6 дисков используют стандартную чашку Петри диаметром 90-100 мм, а для размещения 8 и 12 дисков применяют специальные чашки большого диаметра. Чашки выдерживают при 35-37 ⁰С 18 – 24 ч, после чего учитывают результаты опыта путем измерения зон задержки роста микробов вокруг дисков, включая диаметр самого диска с помощью прозрачной линейки.На результаты определения чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам влияют:

• толщина слоя питательной среды в чашке Петри (4 мм),

• скорость роста исследуемых штаммов,

• величина посевной дозы,

• скорость диффузии антибиотиков из дисков в питательную среду и другие факторы

Дискодиффузный метод позволяет разделить исследуемые возбудители в зависимости от диаметра зоны задержки роста на питательной среде: при зоне диаметром до 10 мм штамм расценивается как устойчивый; 11 – 15 мм – как малочувствительный, 15 – 25 мм – как чувствительный. Зоны, превышающие 25 мм, свидетельствуют о высокой чувствительности микроорганизма к данному антибиотику. Однако нельзя считать этот метод количественным. [4,6]

В своих исследованиях мы использовали девять разных антибиотиков: неомицин, полимиксин, ципрофлоксацин, рифампицин, олеандомицин, оксациллин, ампицилин, амоксицилин, цефазолин. И три разных вида стафилококков (не типированных до вида): st белый и st желтый - взяты смывом с поверхности кожи лица, st 15 - проба из незаживающей раны. Результаты представлены в таблице 1.

Таблица 1. Результаты изучения антибиотикорезистентности исследуемых микроорганизмов

Антибиотики	Исследуемые штаммы бактерий
	1	2	3
1.Неомицин	2,9	2,2	2,2
2. полимиксин	-	1,6	1,5
3.ципрофлоксацин	2,9	2,6	2,6
4. рифампицин	3,3	3	3,8
5.олеандомицин	-	-	-
6.оксациллин	1,7	0,1	0,1
7.ампицилин (амоксицилин)	2,6	2,9	4
8.цефазолин	2,6	2,2	3,2

Из таблицы видно, что исследуемые микроорганизмы были чувствительны к следующим антибиотикам:рифампицин, ципрофлоксацин, цефазолин т.к. образовывали зоны задержки роста от 2,6 до 4 мм.

По окончанию исследования можно сделать вывод, что к наиболее действенными антибиотикам можно отнести: рифампицин, ципрофлоксацин, цефазолин. Олеандомицин не проявил своих заявленных свойств. Причину разных реакций на тот или иной антибиотик, можно объяснить разностью видов, чистотой исследования, правильностью хранения антибиотиков.

Библиографический список:

1. Гранкина А. Антиотикочувствительность бактерий рода Listeria/ Гранкина А. Панина Н., Голякевич З. // Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии: студ. науч. конф.— Ульяновск: УГСХАим. П.А. Столыпина , 2016. - С.52-55.

2. Ефрейторова Е.О. Изучение основных фенотипических биологических свойств фагов бактерий рода SERRATIA/Ефрейторова Е.О., Пульчеровская Л.П., Васильев Д.А., Золотухин С.Н. Агробизнес и экология. 2015. Т. 2. № 2. С. 156-159.

3. Цапалина Е.В. Антибиотикорезистентность бактерий рода CITROBACTER/Цапалина Е.В., Пульчеровская Л.П., Золотухин С.Н.В сборнике: СТУДЕНЧЕСКИЙ НАУЧНЫЙ ФОРУМ -2014 VI Международная студенческая электронная научная конференция: Электронное издание. 2014.

4. Ширманова К. Устойчивость бактерий SERRATIA MARCESCENS к антибиотикам/ Ширманова К., Ефрейторова Е.О., Пульчеровская Л.П. В сборнике: Студенческий научный форум - 2016 VIII Международная студенческая электронная научная конференция, электронное издание. 2016.

5. Пульчеровская, Л.П. Устойчивость бактерий рода CITROBAKTER к антиботикам/Пульчеровская Л.П., Золотухин С.Н., Пульчеровская Е.О. В сборнике: Аграрная наука и образование на современном этапе развития: опыт, проблемы и пути их решения Материалы Международной научно-практической конференции. Редколлегия: А.В. Дозоров, В.А. Исайчев, Д.А. Васильев, С.Н. Золотухин. 2009. С. 82-87.

6. Васильев Д.А. Технология конструирования селективной, транспортной, накопительной сред для Bordetella bronchiseptica // Васильев Д.А. [и др.] // [сборник]: Проблемы профилактики и борьбы с особо опасными, экзотическими и малоизученными инфекционными болезнями животных Международная научно-практическая конференция, посвященная 50-летию ВНИИВВиМ. 2008. С. 123-126.

7. Васильева Ю.Б. Основы подбора компонентов питательных сред для первичного выделения Bordetella bronchiseptica / Васильева Ю.Б. [и др.] // Вестник Ульяновской государственной сельскохозяйственной академии. 2014. № 1 (25). С. 85-93.

8. http://gaimoriti.ru/medikamenty/medterapiya/kogda-i-chem-lechit-zolotistyj-stafilokokk.html

9. Васильева Ю.Б. Зооантропонозные инфекции УМК/ Ю.Б. Васильева, И.И. Богданов – Ульяновск: УГСХА, 2016. – 99 с.

10. Васильева Ю.Б. Интерактивные формы обучения студентов / Ю.Б. Васильева, И.И. Богданов, С.Н. Золотухин, О.Н. Марьина / Материалы научно-методической конференции профессорско-преподавательского состава академии «Инновационные технологии в высшем профессиональном образовании». - 2013. - С. 39-42.

11. Васильева Ю.Б. Эпизоотология и инфекционные болезни животных / Ю.Б. Васильева, И.И. Богданов / Учебное пособие для студентов по специальности "Ветеринарно-санитарная экспертиза" / Ульяновск, 2015.

12. Васильева Ю.Б. Эпизоотология и инфекционные болезни животных / Ю.Б. Васильева, И.И. Богданов / Учебное пособие для студентов по специальности "Ветеринария" / Ульяновск, 2015.

13. Мухин Е.Б. Разработка препарата на основе бактериофагов / Е.Б. Мухин, Ю.Б. Васильева, А.Г. Семанин, А.Г. Загуменнов, Е.И. Суркова / Знания молодых для развития ветеринарной медицины и АПК страны. - 2015. - С. 147-148.

14. Найденова В.А. Инфекции: неизбежность или безответственность? / В.А. Найденова, Ю.Б. Васильева / VII Международная студенческая электронная научная конференция: «Студенческий научный форум – 2015». - Электронное издание. - 2015. - http://www.scienceforum.ru/2015/1064/10921

15. Нафеев А.А. Вопросы эпидемиолого-эпизоотологического надзора за зоонозными инфекциями / А.А. Нафеев, Н.И. Пелевина, Ю.Б. Васильева / Дезинфекционное дело. - 2014. - № 1. - С. 39-43.

16. Нафеев А.А. Зоонозные инфекции, с природной очаговостью, с позиции эпидемиологического и эпизоотологического диагнозов / А.А. Нафеев, Д.А. Васильев,, С.Н. Золотухин, Ю.Б. Васильева / Материалы Международной научно-практической конференции «Актуальные вопросы ветеринарной науки.». - 2015. - С. 50-53.

17. Общая эпизоотология / Ю.Б. Никульшина, А.И. Козин, Д.А. Васильев, Э.А. Афонин. - Ульяновск: УГСХА, 2007. - 209 с.

18. Пирюшова А.Н. Анализ эпизоотической ситуации по карантинным инфекциям / А.Н. Пирюшова, Ю.Б. Васильева / VI Международная студенческая электронная научная конференция: «Студенческий научный форум -2014». Электронное издание. 2014. -http://www.scienceforum.ru/2014/645/5113

19. Пирюшова А.Н. Особо опасные инфекции из-за рубежа / А.Н. Пирюшова, Ю.А. Журавкова, Ю.Б. Васильева / VII Международная студенческая электронная научная конференция: «Студенческий научный форум – 2015». - Электронное издание. - 2015. - http://www.scienceforum.ru/2015/1064/10924

20. Пульчеровская Л.П. Организация самостоятельной работы студентов при изучении клинических дисциплин кафедры МВЭ и ВСЭ / Л.П. Пульчеровская, Н.И. Молофеева, Ю.Б. Васильева, Д.А. Васильев / Материалы научно-методической конференции профессорско-преподавательского состава академии «Инновационные технологии в высшем профессиональном образовании». - 2015. - С. 144-146.

Код для цитирования: Скопировать