IX Международная студенческая научная конференция Студенческий научный форум - 2017

Бактерии родаKlebsiella хорошо растут на простых мясных средах при оптимальной температуре культивирования 35 – 37С и при pH – 7,2. Одной из особенностей бактерий данного рода считают пышный рост, образование на плотных питательных средах крупных слизистых колоний. Обычно первичный высев материала для выделения чистой культуры производят на селективные и дифференциально-диагностические среды, в которых заложен принцип ферментации (агары Плоскирева, Эндо, Левина, Мак-Конки) [1, 2]. Данные среды затрудняют процесс дифференциации клебсиелл по цвету и морфологии от других представителей семейства Enterobacteriaceae, поскольку многие представители этого семейства образуют схожие колонии при культивировании на них. Поэтому процесс идентификации и дифференциации становится трудоемким и приводит к значительному расходу дифференциально-диагностических сред.

Цель исследования заключалась в оценке дифференциально-диагностических свойств питательных сред, используемых при выделении бактерий родаKlebsiella.

Материалы и методы исследований. В работе использовали музейные штаммы кафедры МВЭиВСЭ Ульяновской ГСХА: K. pneumoniae 56, K. oxytoca 2. Посев осуществляли на среды: Эндо, МПА, КL-1 УГСХА. Культивирование осуществляли в условиях термостата, в течение 24-х часов, при 37˚С [3, 4, 5, 6]. В качестве контроля использовали посев на этих же средах штамма E.coli 1.

Результаты исследований и их обсуждение. Результаты интерпретировали на основании анализа особенностей роста культур на средах (таблица 1).

Таблица 1- Анализ ростовых показателей изучаемых штаммов на разных ДДС

Среда (кол-во колоний, диаметр, морфология)	Изучаемый штамм			Пример
	K. pneumoniae 56	K. oxytoca 2	E.coli1
Эндо	Круглые, малиновые колонии, с металлическим блеском (Кол-во выросших колоний-24, диаметр1,5-2,0 мм)	Круглые, малиновые колонии, без металлического блеска (Кол-во выросших колоний-18, диаметр 1,0-1,5 мм)	Круглые, малиновые колонии, с металлическим блеском (Кол-во выросших колоний-30, диаметр 1,5-2,0 мм)
МПА	Круглые, бежевые колонии (Кол-во выросших колоний-31,диаметр 2-3 мм)	Круглые, бежевые колонии (Кол-во выросших колоний-29, диаметр 2-3 мм)	Круглые, бежевые колонии (Кол-во выросших колоний-31, диаметр 2-3 мм)
KL-1 УГСХА	Круглые, оранжевые колонии (Кол-во выросших колоний-39, диаметр 2-3 мм)	Круглые, оранжевые колонии (Кол-во выросших колоний-25, диаметр 2 мм)	Отсутствие роста

Результаты, представленные в таблице 1, позволяют заключить, что рост изучаемых штаммов на данных средах можно охарактеризовать как обильный, с образованием колоний средних размеров- 2-3 мм. Во всех случаях, колонии клебсиелл отличаются от колоний, образованных штаммов кишечной палочки (у первых консистенция слизистая). Количество колоний также варьируется от среды культивирования. Так, на среде КL- 1 УГСХА наблюдается самый обильный рост клебсиелл. Колонии крупные и хорошо отличаемы от колоний гетерогенных штаммов (отсутствие/присутствие роста или дифференциация по цвету- клебсиеллы образуют оранжевые колонии). Поэтому из всех представленных сред, только КL- 1 УГСХА позволяет провести четкую дифференциацию бактерий изучаемых штаммов.

Выводы. Использование, в процессе выделения бактерий рода Klebsiella, среда KL-1 УГСХА является наиболее эффективной. Количество образовавшихся колоний больше, чем при культивировании на среде Эндо, МПА. Среда позволяет четко дифференцировать изучаемый микроорганизм от гетерогенных штаммов.

Библиографический список:

1. Садртдинова Г.Р. Изучение культуральных свойств бактерий вида Klebsiella oxytoca/Г.Р.Садртдинова, Е.А.Ляшенко, Д.А.Васильев// Материалы Международной научно-практической конференции «Биотехнология: реальность и перспективы».- Саратов: Саратовский государственный аграрный университет имени Н.И.Вавилова, 2014.-С.193-196.

2. Садртдинова Г.Р. Агрегация бактерий Klebsiellaoxytoca и Klebsiellapneumoniae под влиянием химического фактора// Инфекция и иммунитет.2015-№.4-С.377-381.

3. Садртдинова Г.Р. Биохимическая активность бактерий вида Klebsiellaoxytoca/ Г.Р. Садртдинова, С.Н. Золотухин, Д.А. Васильев// Материалы VII Международной научно-практической конферен­ции «Аграрная наука и образование на современном этапе развития: опыт, проблемы и пути их решения» / - Ульяновск: УГСХА, 2016. Т. III. – С.261-265.

4. Садртдинова Г.Р. Создание селективной среды для выделения, дифференцирования и идентификации бактерий рода Klebsiella/ С.Н. Золотухин, Д.А. Васильев, Г.Р. Садртдинова// Материалы VII Международной научно-практической конферен­ции «Аграрная наука и образование на современном этапе развития: опыт, проблемы и пути их решения» / - Ульяновск: УГСХА, 2016. Т. III. – С.266-269.

5. Садртдинова Г.Р .Повышение селективных и дифференциально- диагностических свойств плотной агаровой среды, предназначенной для выделения бактерий рода Klebsiella// Материалы IV Международной научно-практической конференции молодых ученых «Молодежь и наука XXI века». – Ульяновск: Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина, 2014,т.1 – С. 122-127.

6. Садртдинова Г.Р. Эффективность использования гектоенового энтеро-агара идентификации бактерий Klebsiella oxytoca//Достижения молодых ученых в ветеринарную практику: Материалы IV Международной научной конференции, посвященной 55-летию аспирантуры ФГБУ «ВНИИЗЖ», 6 декабря 2016 г. / под редакцией Д.А. Лозового. – Владимир: ФГБУ «ВНИИЗЖ», 2016. –С.134-137.

Код для цитирования: Скопировать