IX Международная студенческая научная конференция Студенческий научный форум - 2017

Род Proteus относится к семейству Enterobacteriaceae и включает следующие виды: Pr. vulgaris, Pr. mirabilis, Pr. morganii, Pr. rettgeri.

Бактерии рода Proteus - полиморфные палочки размером 0,5-0,6х1,2-3 мкм, подвижные (перетрихи) грамотрицательные, не образующие спор и капсул. Факультативные анаэробы

Микроорганизмы этой группы, в частности вид Pr. vulgaris, в небольшом количестве встречается как в кишечнике человека и животного, так и во внешней среде. Он является возбудителем гнилостных процессов в природе. Вид Pr. mirabilis - обитатель кишечника человека и животных. В отличие от уже рассмотренных санитарно-показательных микроорганизмов (бактерий группы кишечных палочек, энтерококков, Cl. periringens), палочки Proteus встречаются в кишечнике человека сравнительно в небольшом количестве (в 5-10 % случаев); в кишечнике лошадей, крупного рогатого скота и других животных их обнаруживают чаще, особенно летом. Из вышеизложенного следует, что бактерии рода [1-5].

Нами из 2 проб фекалий поросят и 1 пробы сточной воды частного домовладения в р.п. Чердаклы Ульяновской области были выделены микроорганизмы, которые мы типировали как бактерии Proteus по схеме, отработанной Н.А. Феоктистовой [6-10].

Далее мы решили выяснить, какими антибиотикорезистентными свойствами обладают выделенные культуры рода Proteus.

Наиболее частым методом определения антибиотикочувствительности возбудителей заболеваний является диск-диффузионный метод, с использованием стандартных дисков, содержащих определенное количество антибиотика. В силу определенных причин, реже применяют количественные методы оценки чувствительности – метод серийных разведений в жидкой или плотной питательной среде, с помощью которых определяется минимальная подавляющая концентрация (МПК). Для определения антибиотикочувствительности также используют Е-тест, представляющий собой пластиковую полоску c нанесенным градиентом концентрации антибиотика. Этот метод основан на диффузии антибиотиков в агар и позволяет определять значение МПК. В последние годы бактериологические лаборатории оснащаются автоматизированными системами для идентификации и определения антибиотикочувствительности микроорганизмов с использованием готовых тест-систем.

Ход исследований

1. Диски с антибиотиками наносили на поверхность инокулированного исследуемой культурой и подсушенного агара.

2. Контакт диска с агаром должен быть плотным.

3. После нанесения на поверхность агара диски нельзя было передвигать, так как диффузия антибиотика в среду начинается очень быстро.

4. Количество дисков на одной чашке Петри было ограниченным, для предотвращения перекрывания зон подавления роста, а также взаимодействия между антибиотиками.

5. Максимальное количество дисков на одной чашке Петри зависит от вида микроорганизма и исследуемых антибиотиков. На одну чашку диаметром 90 мм следует помещать не более 6 дисков.

6. После инокуляции и нанесения дисков чашки Петри в течение 15 мин были помещены в термостат вверх дном.

7. При измерении зон подавления роста вокруг дисков с любыми АМП ориентировались на зону полного подавления роста микроорганизмов, определяемую невооруженным глазом, при расположении чашки на расстоянии примерно 30 см от глаз.

8. Измерение зон подавления роста проводили с точностью до миллиметра при помощи линейки.

9. Для измерения зон подавления роста на оптически-прозрачной среде чашку Петри с закрытой крышкой располагали дном кверху на темную матовую поверхность, так чтобы свет падал на нее под углом 45° (учет в отраженном свете).

Результаты исследований отражены в таблице 1.

Таблица 1 – Результаты изучения антибиотикочувствиетльности

бактериофагов рода Proteus, выделенных из проб фекалий

и сточных вод

№№	Название антибиотиков	Диаметр зоны лизиса, мм
		Фекалии свиней 1	Фекалии свиней 2	Сточные воды
1	цефтриаксон	33	15	14
2	амоксициллин	15	6	15
3	оксациллин	13	8	14
4	фурадонин	12	12	12
5	рифампицин	15	15	17
6	цефазолин	30	15	14
7	неомицин	20	20	25
8	офлоксацин	28	25	23
9	ампициллин	15	19	25
10	каномицин	20	13	24
11	линкомицин	8	7	12
12	тетрациклин	17	7	10
13	левомицетин	7	10	15
14	ципрофлокссацин	25	26	25

Отсутствие задержки роста Proteus указывает на резистентность исследуемого микроба к данному антибиотику. Зоны, диаметр которых не превышает 15 мм, свидетельствуют о слабой чувствительности к антибиотику. Зоны от 15 до 25 мм встречаются у чувствительных микробов. Высокочувствительные микробы характеризуются зонами с диаметром более 25 мм.

Нами установлено, что бактерии рода Proteus, выделенные из различных проб окружающей среды обладают различной антибиотикочувствительностью.

Библиографический список

1. Васильев, Д.А. Выделение и изучение биологических свойств протейных бактериофагов, разработка метода фагоиндикации / Д.А. Васильев, Н.А. Феоктистова, С.Н. Золотухин // В сборнике: проблемы профилактики и борьбы с особо опасными, экзотическими и малоизученными инфекционными болезнями животных. – Ульяновск, 2008. - С. 253-256.

2. Васильев, Д.А. Внедрение результатов научно-исследовательской работы в образовательный процесс / Д.А. Васильев, Н.А. Феоктистова, М.А. Лыдина / В сборнике: инновационные технологии в высшем профессиональном образовании материалы научно-методической конференции профессорско-преподавательского состава академии . – Ульяновск, 2013. - С. 34-39.

3. Голоушкина, А.С. Разработка фагового биопрепарата для лечения и профилактики протейной инфекции / А.С. Голоушкина, С.Э. Зимукова, Н.А. Феоктистова, М.А. Лыдина, Д.А. Васильев // В сборнике: Студенческий научный форум -2014 международная студенческая электронная научная конференция: электронное издание. 2014.

4. Золотухин, С.Н. Бактериофаги малоизученных энтеробактерий и перспективы их применения в ветеринарии / С.Н. Золотухин, Д.А. Васильев, А.С. Мелехин, Е.А. Бульканова, Н.А. Феоктистова, Е.Н. Пожарникова // Ветеринарная патология. - 2006. - № 3. - С. 79-84.

5. Золотухин, С.Н. Штаммы бактериофагов малоизученных патогенных энтеробактерий и их практическое применение / С.Н. Золотухин, Д.А. Васильев, Л.С. Каврук, Л.П. Пульчеровская, Н.И. Молофеева, Б.М. Коритняк, А.Ю. Кузнецов, Е.А. Бульканова, Е.Н. Пожарникова, Н.А. Феоктистова, А.С. Мелехин, С.В. Ленев // В сборнике: научные разработки и научно-консультационные услуги Ульяновской ГСХА информационно-справочный указатель. - Ульяновск, 2006. - С. 45-49.

6. Феоктистова, Н.А. Выделение и изучение биологических свойств бактериофагов рода Proteus, конструирование на их основе биопрепарата и разработка параметров практического применения / Н.А. Феоктистова // Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук / Саратовский государственный аграрный университет им. Н.И. Вавилова. - Саратов, 2006. – С.3.

7. Феоктистова, Н.А. Выделение и изучение биологических свойств бактериофагов рода Proteus, конструирование на их основе биопрепарата и разработка параметров практического применения / Н.А. Феоктистова // диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Саратовский государственный аграрный университет им. Н.И. Вавилова. - Саратов, 2006. – С. 6-10.

8. Феоктистова, Н.А. Методы лабораторной диагностики заболеваний, вызываемых бактериями рода Proteus, или протекающих с их участием / Н.А. Феоктистова, Д.А. Васильев, С.Н. Золотухин // Вестник ульяновской государственной сельскохозяйственной академии. - 2004. - № 12. – С. 46-50.

9. Феоктистова, Н.А. Постановка реакции нарастания титра фага для индикации бактерий рода Proteus в объектах ветеринарно-санитарного надзора / Н.А. Феоктистова, Д.А. Васильев, С.Н. Золотухин // Аграрная наука и образование на современном этапе развития: опыт, проблемы и пути их решения. - 2012. - т. 1. - с. 327-333.

10. Феоктистова, Н.А. Организация научно-исследовательской работы обучающихся на кафедре микробиологии, вирусологии, эпизоотологии и ВСЭ / Н.А. Феоктистова, Д.А. Васильев, С.Н. Золотухин, М.А. Лыдина. // В сборнике: инновационные технологии в высшем профессиональном образовании материалы научно-методической конференции профессорско-преподавательского состава академии. – Ульяновск, 2015. - С. 190-197.

Код для цитирования: Скопировать