IX Международная студенческая научная конференция Студенческий научный форум - 2017

Известно, что Lactobacillus spp. являются доминирующим представителем среди микроорганизмов, формирующих биопленку в кишечнике [1], а также в ротовой полости [3]. Кроме этого, показана роль лактобактерий в поддержании колонизационной резистентности женского генитального тракта [2]. В образовании биопленок ведущую роль играет экзополисахарид, который обеспечивает колонизацию и выживание популяции.

Цель исследования – изучить формирование биопленок штаммами Lactobacillus spp., выделенными из клинических образцов и пробиотиков.

Материалы и методы: В работе использовали штамм Lactobacillus acidophilus, полученный из коммерческого препарата «Лактобактерин», 16 клинических штаммов, выделенных из фекалий людей, а также 11 штаммов L.casei, полученные из кисломолочных пробиотических продуктов. Биопленкообразующую активность штаммов изучали в планшетах для ИФА. В лунки планшета вносили по 150 мкл суспензии тестируемых культур. В контрольные лунки вносили среду МРС. Планшеты с пробами инкубировали в течение 72 ч при 37^оС в микроаэрофильных условиях. Затем лунки промывали и окрашивали 1% спиртовым раствором основного фуксина с последующей спиртовой экстракцией связавшегося красителя. Детекцию окрашенных экстрактов биопленок осуществляли на ридере ChroMate (Awareness Technology Inc., USA) при длине волны 492 нм (Тезиков, 2014). Результаты выражали в единицах оптической плотности. Статистическую обработку данных проводили с использованием парного варианта t-критерия Стьюдента.

Результаты исследования: В ходе проведенных исследований было установлено, что штамм L. acidophilus формирует биопленку в широком диапазоне исходной концентрации микробных тел. Так при концентрации бактерий 10⁹ КОЕ/мл толщина биомассы пленки составила 0,685±0,143, а при 10⁴ КОЕ/мл – 0,388±0,069, что статистически значимо выше, чем при концентрации бактерий 10³ КОЕ/мл и показателей контрольных лунок со средой МРС. Клинические штаммы при исходной концентрации микроорганизмов 10⁷ КОЕ/г формируют гораздо менее выраженную биопленку – 0,188±0,011 (L. acidophilus 10³ КОЕ/мл – 0,373±0,072; p0,05).

Заключение. Таким образом, проведенные исследования показали штаммовые отличия биопленкообразующей активности микроорганизмов рода Lactobacillus. Выявлена низкая способность к биопленкообразованию у клинических штаммов и лактобактерий кисломолочных продуктов.

Список литературы

1. Годовалов А.П., Быкова Л.П., Никулина Е.А., Ожгибесов Г.П. Изучение микробного пейзажа толстого кишечника при кандидозном носительстве // Медицинский вестник МВД. – 2016. – Т. 80, № 1(80). – С. 41-43.

2. Годовалов А.П., Карпунина Н.С., Карпунина Т.И. Микробиота кишечника и влагалища женщин со вторичным бесплодием и заболеваниями желудочно-кишечного тракта // Экспериментальная и клиническая гастроэнтерология. – 2016. – № 6 (130). – С. 109-113.

3. Reynolds L.A., Smith K.A., Filbey K.J., Harcus Y., Hewitson J.P., Redpath S.A., Valdez Y., Yebra M.J., Finlay B.B., Maizels R.M. Commensal-pathogen interactions in the intestinal tract // Gut. Microbes. – 2014. – Vol. 5(4). – P. 522-532.

Код для цитирования: Скопировать